Termotsükler on seade, mis võimaldab polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) tõhusalt ja kiiresti; desoksüribonukleiinhappe (DNA) ahela amplifitseerimiseks vajalike temperatuurimuutuste automaatse ja tsüklilise realiseerimise abil; termostabiilsest ensüümist.

Termotsükleid kasutatakse kvalitatiivseks amplifikatsiooniks või amplifitseeritud DNA koguse määramiseks. Nende DNA amplifikatsioonitehnikate tulemustel on meie ühiskonnale suur mõju; eriti praegusel pandeemiaperioodil, mil neist on saanud üks peamisi diagnostilisi teste, mistõttu tuleb tagada termotsükleri täpsus; täpsed ja järjepidevad, et saada usaldusväärseid tulemusi.

Kõige tavalisem mudel koosneb elektritakistuse plokist, mis jaotab homogeense temperatuuri plaadi vahel programmeeritavateks aegadeks, tavaliselt temperatuurivahemikus 4 °C kuni 96 °C, kus DNA molekul denatureerub, hübridiseerub ja pikendatakse.

Mis on polümeraasi ahelreaktsioon või PCR?

Polümeraasi ahelreaktsioon, ingliskeelse akronüümi järgi lühendatult PCR (polümeraasi ahelreaktsioon), on tehnika, mis võimaldab huvipakkuvat DNA fragmenti eksponentsiaalselt amplifitseerida. See tähendab, et selle fragmendi väikesest arvust koopiatest saadakse pärast PCR reaktsiooni miljoneid koopiaid, mis on juba laboris kergesti tuvastatavad. PCR leiutas Kary Mullis 1986. aastal ja pälvis ta 1993. aastal Nobeli preemia.

Kuidas PCR viiakse läbi?

PCR-reaktsioon nõuab matriitsi DNA, praimerite, nukleotiidide ja DNA polümeraasi olemasolu. DNA polümeraas on võtmeensüüm, mis matriits-DNA abil teeb sellest koopia, lisades nukleotiide järjestikku PCR-produkti. Nukleotiidid adeniin, tümiin, tsütosiin ja guaniin on saadud uue koopia ehitusplokid. Praimerid või oligonukleotiidid on need, mis annavad reaktsioonile spetsiifilisuse, kuna need on lühikesed DNA fragmendid, mille järjestus on komplementaarne sihtmärk-DNA-ga, mida soovitakse amplifitseerida. DNA polümeraas kasutab praimereid uue DNA fragmendi polümerisatsiooni lähtepunktina.

PCR komponendid segatakse katseklaasis ja asetatakse seejärel masinasse, mis võimaldab korduvaid DNA amplifikatsiooni tsükleid. Masin on termotsükler kui aukudega termoplokk, millesse torud sisestatakse. Termotsükler tõstab ja langetab ploki temperatuuri kolmes põhilises eelprogrammeeritud etapis. Reaktsioonisegu kuumutatakse esimest korda üle siht-DNA kahe komplementaarse DNA ahela denaturatsioonipunkti, võimaldades ahelatel eralduda. Seejärel alandatakse temperatuuri, et võimaldada spetsiifilistel praimeritel seonduda sihtmärk-DNA segmentidega, seda protsessi nimetatakse hübridisatsiooniks. Temperatuuri tõstetakse uuesti temperatuurini, mille juures DNA polümeraas on võimeline praimereid pikendama, lisades konstrueeritavale DNA ahelale nukleotiide. Nende kolme etapi iga kordusega kopeeritud DNA molekulide arv kahekordistub. Pärast 30-40 tsüklit ühest DNA koopiast on rekordajaga võimalik saada rohkem kui miljard koopiat geenist.

At Kalstein oleme TOOTJAD ja pakume teile suurepäraseid termotsükleid kõige arenenuma tehnoloogiaga ja parimate HINDADEGA. Seega kutsume teid vaatama: SIIN