Termotsükler on molekulaarbioloogia laboriseade, mida kasutatakse DNA molekulide amplifitseerimiseks PCR tehnikaga (polümeraasi ahelreaktsioon), kuna see on võimeline teostama DNA ahelate amplifitseerimiseks vajalikke temperatuuritsükleid.

PCR protsess on automaatne ja selle saab lõpule viia vaid mõne tunniga. Seda protsessi juhib täielikult termotsükkel, kes on programmeeritud muutma reaktsiooni temperatuuri iga paari minuti järel, muutes DNA denaturatsiooni ja sünteesi.

Termotsükler on erinev, kui tehakse lõpp-punkti PCR või reaalajas PCR, kuna viimane peab tuvastama fluorestsentsi ja erinevates neeldumiskanalites.

Kõige tavalisem termotsükleri mudel koosneb elektritakistuse plokist, mis jaotab programmeeritava aja jooksul ühtlase temperatuuri (vahemikus 4 °C kuni 96 °C) läbi plaadi. Mõnes meeskonnas on elektritakistus asendatud Peltieri (pooljuhtide) tehnoloogiaga, mis võimaldab temperatuuri suuremat homogeensust.

Astmed termotsükleri sisse

Termorakk töötab PCR-tehnika käigus läbi kolme olulise etapi. Esimene samm on denatureerimine, mis toimub esimeses tsüklis. Sealt edasi järgmistesse tsüklitesse, et eraldada moodustunud kiud. Sel ajal jääb temperatuur vahemikku 94–98 ºC. See protsess kestab vähemalt 10 sekundit.

Teine samm koosneb esimeste joondamisest vormi keermes, mida soovite võimendada. Läbipääs kestab umbes 20 sekundit ja selle temperatuur võib muutuda muutuvaks. See juhtub seetõttu, et see sõltub rohkem kui kõik selles toimingus kasutatud esimesed. Esimesed on väikesed 20 nukleotiidist koosnevad järjestused, milles kasutatakse lihtsuhkrutega tehtud teste. Paljudel juhtudel on selle osaks glükoos, seda tüüpi testide jaoks kasutatav temperatuur jääb vahemikku 55–65 ºC, kuigi mõnel võib ulatuda kuni 72 ºC. See on Taq polümeraasiga töötamiseks sobiv temperatuur.

Termotsükleri puhastus ja hooldus

Termosilaatori optimaalsete töötingimuste säilitamiseks peate pärast selle elektrivoolust lahtiühendamist ja kontrollimist, et see pole kuum, läbima järgmised puhastustoimingud:

• Puhastage korpust või välisosa neutraalse pH-ga seebilahuses kergelt niisutatud pehme lapiga (ärge kasutage vahasid ega abrasiivseid aineid).
• Puhastage plaadi süvendid isopropanoolis või metanoolis niisutatud vatitupsudega. Kaane termopinda tuleks puhastada ka isopropanoolis niisutatud pehme lapi või paberiga. Kui termoploki kaevud on väga määrdunud, peame kasutama 1% naatriumhüpokloriti lahuses niisutatud paate ja seejärel lõpetama puhastamise 95% etanooliga. Kaevud ei tohi kunagi olla märjad.
• Puhastage ventilatsioonisüsteem. On väga oluline, et seda ei takistaks kleepunud osakesed, mille jaoks ei tohiks teil olla muid seadmeid, mis toodavad soojust või nõuavad õhku 30 cm raadiuses.

In Kalstein me valmistame ja anname teie käsutusse suurepärase valiku termotsükleid parimate hindadega. Seetõttu kutsume teid vaatama meie saadaolevaid termotsükleid: SIIN